- 2025-01-21 09:31:20羅丹明標(biāo)記肽
- 羅丹明標(biāo)記肽是一種經(jīng)過(guò)特殊標(biāo)記的肽類(lèi)化合物，其中羅丹明作為一種熒光染料，通過(guò)化學(xué)鍵與肽鏈相連。這種標(biāo)記技術(shù)使得肽在特定波長(zhǎng)光的激發(fā)下能夠發(fā)出熒光，從而便于在生物實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行追蹤、檢測(cè)和定量分析。羅丹明標(biāo)記肽廣泛應(yīng)用于生物學(xué)研究、藥物開(kāi)發(fā)以及疾病診斷等領(lǐng)域，如用于細(xì)胞成像、蛋白質(zhì)相互作用研究及酶活性檢測(cè)等。其高靈敏度和特異性為科學(xué)研究提供了有力工具。
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羅丹明標(biāo)記肽問(wèn)答
- 2022-07-22 15:27:25熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)，熒光標(biāo)記怎么選？
- 熒光定量PCR技術(shù)是將常規(guī)的PCR和熒光檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，以此實(shí)現(xiàn)對(duì)初始模板的定量分析。熒光定量PCR技術(shù)作為當(dāng)今生物學(xué)研究的重要手段之一，在基礎(chǔ)科學(xué)、生物技術(shù)、醫(yī)學(xué)研究、法醫(yī)學(xué)、診斷學(xué)等多方面具有廣泛的應(yīng)用前景。說(shuō)到熒光定量PCR技術(shù)，我們經(jīng)常會(huì)問(wèn)類(lèi)似于“你的實(shí)驗(yàn)是染料法還是探針?lè)ā保澳阌玫奶结樖鞘裁搭?lèi)型”等之類(lèi)的問(wèn)題，這其實(shí)是對(duì)熒光標(biāo)記的選擇。根據(jù)熒光標(biāo)記的不同，可以將熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)分為探針?lè)ê腿玖戏▋纱箢?lèi)。染料法染料法利用能與DNA雙鏈結(jié)合的染料來(lái)實(shí)現(xiàn)，如SYBR Green I。該染料在游離狀態(tài)下呈現(xiàn)微弱的熒光，一旦與雙鏈DNA的雙螺旋小溝結(jié)合，其綠色熒光增強(qiáng)約1000倍。因此其總的熒光強(qiáng)度與雙鏈DNA含量成正比，利用這一關(guān)系可以反映生成的PCR產(chǎn)物的量（圖 1）。SYBR Green I的吸收約在497 nm，發(fā)射波長(zhǎng)約在520 nm，與FAM熒光分子的光譜性質(zhì)類(lèi)似，因此在所有的熒光定量PCR設(shè)備中都是通道檢測(cè)，即“FAM/SYBR Green I”通道。▲ 圖1 染料法原理圖理論上，所有能與雙鏈DNA結(jié)合的染料都可以用于qPCR檢測(cè)，如溴化乙錠EtBr，碘化丙啶PI，吖啶橙、Cy3等。而選擇用于qPCR反應(yīng)的染料通常會(huì)從信號(hào)強(qiáng)度、生物安全性、檢測(cè)簡(jiǎn)便性和經(jīng)濟(jì)適用性這幾個(gè)因素考慮。例如EtBr可能存在潛在的致癌性。綜合考慮下來(lái)，SYBR Green I成了比較理想的選擇。目前，使用Evagreen的實(shí)驗(yàn)者也越來(lái)越多，Evagreen作為一種新型的染料，其光譜性質(zhì)與SYBR Green I類(lèi)似，其優(yōu)勢(shì)在于：? 對(duì)PCR反應(yīng)的抑制程度小。高濃度SYBR Green I會(huì)強(qiáng)烈抑制PCR反應(yīng)，因此要控制其使用濃度，一定程度上降低了DNA檢測(cè)的靈敏度。? 與DNA結(jié)合密度高。單位長(zhǎng)度的DNA雙鏈上Evagreen的密度更高，為飽和型染料，消除了SYBR Green I存在的“染料重分布”的缺陷，提高檢測(cè)靈敏度的同時(shí)也可用于高分辨率溶解曲線HRM。? 化學(xué)性質(zhì)更穩(wěn)定，適合長(zhǎng)期保存。TaqMan 探針TaqMan 探針基本可以滿足60%以上的qPCR實(shí)驗(yàn)，如常規(guī)的基因表達(dá)和拷貝數(shù)變異CNV實(shí)驗(yàn)。TaqMan 熒光探針是一種寡核苷酸探針，熒光基團(tuán)連接在探針的5'末端，而淬滅劑則在3'末端（圖2）。PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針，探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收; PCR擴(kuò)增時(shí), Tag酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)，每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。常用的熒光基團(tuán)是FAM，TET，VIC，HEX。▲ 圖2 Taqman探針MGB探針對(duì)于要分辨單堿基差異的SNP實(shí)驗(yàn)，采用對(duì)堿基錯(cuò)配容忍度更低的MGB探針，在淬滅基團(tuán)后加入了DPI3基團(tuán)（圖3），從而提高了與靶標(biāo)結(jié)合的親和力；而且可以對(duì)靶點(diǎn)堿基進(jìn)行化學(xué)修飾，如PeptideNucleic Acid和Locked Nucleic Acid?！?圖3 MGB探針雙雜交探針Taqman探針對(duì)探針的長(zhǎng)度有比較嚴(yán)格的要求，雙雜交探針則消除了這一“缺陷”。雙雜交探針是由兩條寡核苷酸單鏈組成，一條的3’端帶有供體熒光分子，另一條的5’端帶有受體熒光分子（圖4）。游離狀態(tài)下熒光供體會(huì)發(fā)出熒光，但當(dāng)兩條單鏈都匹配到模板鏈上時(shí)，就會(huì)發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移FRET，受體熒光分子就可以發(fā)出熒光，其熒光強(qiáng)度與生成的產(chǎn)物的量成正比。雙雜交探針的優(yōu)勢(shì)有兩點(diǎn)：擺脫了探針長(zhǎng)度的限制，較長(zhǎng)的探針可以提高與模板匹配的成功率；只有上下游兩條探針都正確匹配后才能檢測(cè)到受體熒光分子發(fā)出的熒光，特異性有所提高?！?圖4 雙雜交探針?lè)肿有艠?biāo)探針游離狀態(tài)下，分子信標(biāo)探針是一種莖環(huán)結(jié)構(gòu)，其環(huán)狀部分的15-30個(gè)堿基可以與靶標(biāo)區(qū)域相結(jié)合匹配，下端的配對(duì)區(qū)域（左右一般各5-6個(gè)堿基）則由重復(fù)的GC組成，從而將5’的熒光分子和3’的淬滅基團(tuán)緊緊聚在一起，熒光發(fā)生淬滅；當(dāng)退火時(shí)，分子信標(biāo)探針解開(kāi)環(huán)并與模板靶標(biāo)雜交，這樣熒光分子和淬滅基團(tuán)的物理距離就變大了，熒光淬滅的前提就打破了（圖5）。除了MGB探針，分子信標(biāo)探針也非常適合用于SNP檢測(cè)?！?圖5 分子信標(biāo)探針除了上述幾種類(lèi)型的探針之外，還有嘗試將引物和探針功能相結(jié)合的技術(shù)，如Amplifluor、LUX等，在設(shè)計(jì)難度上有所提高，但使用時(shí)更簡(jiǎn)便。各有其應(yīng)用的側(cè)重點(diǎn)和設(shè)計(jì)上的利弊，在此不多贅述。那么在熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中，我們應(yīng)該如何進(jìn)行選擇呢？在這里，給大家總結(jié)了一些兩種方法的區(qū)別，供大家參考。表1 染料法和探針?lè)ǖ膮^(qū)別
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- 2023-07-06 09:40:26野生菌正當(dāng)季，普瑞邦新品助力鵝膏毒肽檢測(cè)
- 野生菌又稱蘑菇、蕈，是一類(lèi)大型真菌，按照能否食用，可分為食用菌和有毒菌。多數(shù)毒蘑菇的毒性較低，中毒表現(xiàn)輕微，但有些蘑菇毒素的毒性極高，可迅速致人死亡。一種毒蕈可能含有多種毒素，一種毒素可存在于多種毒蕈中。確定毒性較強(qiáng)的蘑菇毒素主要有鵝膏肽類(lèi)毒素（毒肽、毒傘肽）、鵝膏毒蠅堿、光蓋傘素等。黃蓋鵝膏劇毒 有毒鵝膏基本都具有菌環(huán)和菌托這兩個(gè)特征結(jié)構(gòu)，但是有些食毒不明或可食鵝膏也具有這兩個(gè)特征，一些著名的味道鮮美的可食鵝膏，例如橙蓋鵝膏、隱花青鵝膏同樣既有菌環(huán)又有菌托，而某些劇毒鵝膏又與可食鵝膏外觀長(zhǎng)得非常相似，例如劇毒的灰花紋鵝膏和可食的隱花青鵝膏，因此對(duì)于老百姓來(lái)說(shuō)，很難從外觀上來(lái)區(qū)分哪些是可食鵝膏，哪些是有毒鵝膏。 據(jù)統(tǒng)計(jì)，在誤食毒蘑菇導(dǎo)致的中毒死亡事件中，高達(dá)70％的事件是因?yàn)檎`食劇毒鵝膏菌引起的。鵝膏菌的致死性毒素是鵝膏肽類(lèi)毒素，根據(jù)其氨基酸組成和結(jié)構(gòu)可以分為鵝膏毒肽、鬼筆毒肽和毒傘肽三類(lèi)。其中，鵝膏毒肽是一種雙環(huán)八肽，其化學(xué)性質(zhì)十分穩(wěn)定，一般的烹調(diào)加工無(wú)法破壞其毒性。 野生菌正當(dāng)季，普瑞邦順勢(shì)推出檢測(cè)鵝膏毒肽毒素快速定性檢測(cè)試紙條新品，為科學(xué)識(shí)別毒蘑菇助一臂之力。本產(chǎn)品采用膠體金免疫層析法，可用于快速檢測(cè)蘑菇相關(guān)樣品中鵝膏毒素的殘留量，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程只需 10 分鐘，適用于各類(lèi)企業(yè)及檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)快速篩查。產(chǎn)品編號(hào)產(chǎn)品名稱產(chǎn)品規(guī)格PRS-AM10PriboStrip?鵝膏毒肽快速定性檢測(cè)試紙條25T 普瑞邦推出α-鵝膏毒肽等6種蘑菇毒素檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品。在BJS 202008方法規(guī)定中蘑菇中α-鵝膏毒肽、β-鵝膏毒肽、γ-鵝膏毒肽、羧基二羥基鬼筆毒肽、羧基三羥基鬼筆毒肽和二羥基鬼筆毒肽6種蘑菇毒素可采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法進(jìn)行測(cè)定。普瑞邦蘑菇毒素檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品產(chǎn)品編號(hào)產(chǎn)品名稱STD#9101Pribolab?10 μg/mLα-鵝膏毒肽/水STD#9102Pribolab?10 μg/mLγ-鵝膏毒肽/水STD#9103Pribolab?10 μg/mL 羧基二羥鬼筆毒肽 (Phalloidin)/水STD#9105Pribolab?10 μg/mL 二羥鬼筆毒肽 (Phalloidin)/水STD#9106Pribolab?10 μg/mL β-鵝膏菌素 (β-Amanitin)/水STD#9108Pribolab?10 μg/mL 羧基三羥鬼筆毒肽 (phallisacin)/水溫馨提示： 有些毒蘑菇和食用菌的外觀相似，且并沒(méi)有快速可靠的鑒別方法，根據(jù)傳統(tǒng)的特定經(jīng)驗(yàn)和方法識(shí)別正是造成誤食毒蘑菇中毒的原因之一。因此要避免毒蘑菇中毒事件的發(fā)生，最重要的就是不吃野生菌、不自行采摘野生菌。
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- 2022-12-14 14:26:52naica?微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)對(duì)韓牛分子標(biāo)記物的準(zhǔn)確評(píng)估
- 導(dǎo)讀韓牛（Bos taurus coreanae）是一種馴化的哺乳動(dòng)物，在韓國(guó)消費(fèi)市場(chǎng)作為食物資源，其牛肉消費(fèi)量遠(yuǎn)超其他品種，這種消費(fèi)模式導(dǎo)致了區(qū)分韓牛和其他牛品種的分子研究的出現(xiàn)。不僅是牛，其他經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的不同品種在市場(chǎng)中的經(jīng)濟(jì)價(jià)值也存在較大的差異，所以準(zhǔn)確進(jìn)行種質(zhì)鑒定勢(shì)在必行。在之前的一項(xiàng)研究中，使用傳統(tǒng)的PCR方法和Sanger測(cè)序驗(yàn)證確定了由TE關(guān)聯(lián)缺失事件產(chǎn)生的韓牛特異性SV。它可以用作區(qū)分不同牛品種的分子標(biāo)記（即韓牛與荷斯坦牛）。然而，PCR存在缺陷，每個(gè)樣品都有各種最終拷貝定量。為了克服傳統(tǒng)PCR的局限性，并準(zhǔn)確評(píng)估先前研究中確定的韓牛特異性SV位點(diǎn)，檀國(guó)大學(xué)生物醫(yī)學(xué)科學(xué)系聯(lián)合畜牧研究所和檀國(guó)大學(xué)醫(yī)學(xué)院，使用naica??微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)對(duì)韓牛特異性SV位點(diǎn)進(jìn)行了更為精確的檢測(cè)，并將成果《Quantitative evaluation of the molecular marker using droplet digital PCR》發(fā)表在Genomics & Informatics雜志上。轉(zhuǎn)座元件（TEs）約占?；蚪M的一半。它們可以是一個(gè)強(qiáng)大的物種特異性標(biāo)記，在基因組進(jìn)化時(shí)沒(méi)有結(jié)構(gòu)變異（SV）的回歸突變。因此，作者應(yīng)用naica??微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)對(duì)韓牛特異性SV進(jìn)行準(zhǔn)確的定量檢測(cè)。雖然樣品在韓牛群體中的等位基因頻率變化較低，但naica??微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)可以通過(guò)絕對(duì)定量進(jìn)行高靈敏度檢測(cè)，可以做到比PCR更準(zhǔn)確的定量。所以naica??微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)平臺(tái)相比于傳統(tǒng)PCR更適用于分子標(biāo)志物的定量評(píng)價(jià)。應(yīng)用亮點(diǎn)：? 使用naica?微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)對(duì)韓牛特異性SV進(jìn)行準(zhǔn)確的定量檢測(cè)。? dPCR測(cè)定在計(jì)數(shù)單分子和分析特定群體的少量拷貝時(shí)可以高精度地定量，與qPCR相比，具有更高的準(zhǔn)確性。? 經(jīng)過(guò)sanger測(cè)序，確定了naica??微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)檢測(cè)準(zhǔn)確無(wú)誤，且操作和成本均低于測(cè)序。? naica??微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)適用于分子標(biāo)志物的定量評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)方法：檢測(cè)樣本信息：共提取了五個(gè)棕色韓牛DNA和五個(gè)荷斯坦DNA作為實(shí)驗(yàn)樣本。檢測(cè)方法：為了更準(zhǔn)確地檢測(cè)韓牛特異性SV，將“Del_96”位點(diǎn)應(yīng)用于naica??微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)（Stilla Technologies）。進(jìn)行naica??微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)前確認(rèn)韓牛和荷斯坦牛的DNA的濃度定量。FAM引物組和FAM探針用于檢測(cè)韓牛和荷斯坦?；蚪M。VIC引物組和VIC探針設(shè)計(jì)在韓牛特異性缺失（圖 1B)。因此，F(xiàn)AM引物組和FAM探針（陽(yáng)性對(duì)照）設(shè)計(jì)在所有牛DNA中檢測(cè)。VIC引物組和VIC探針設(shè)計(jì)用于僅檢測(cè)韓牛的熒光。▲圖 1B實(shí)驗(yàn)結(jié)果：FAM染料在所有?；蚪M中均被檢測(cè)到，VIC染料僅在韓牛樣品中顯示出顯著的檢測(cè)。這表明所有韓?；蚪M都包含特定的缺失序列（Del_96區(qū)域）。在韓牛樣品中檢測(cè)到VIC染料的信號(hào)平均濃度為243（copies/ μL）。雖然在荷斯坦樣品中也檢測(cè)到平均濃度0.12（copies/μL）的VIC染料信號(hào)，但這些信號(hào)相比韓牛可忽略不計(jì)?！鴑aica?微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)檢測(cè)韓Del_96和荷斯坦樣品之間區(qū)域的絕對(duì)拷貝數(shù)比較。濃度圖在 X 軸上指示樣品數(shù)，在 Y 軸上指示對(duì)數(shù)刻度條（拷貝/μL）。（A）在所有樣品中檢測(cè)到FAM熒光。韓牛樣品的絕對(duì)拷貝數(shù)大約是荷斯坦樣品的兩倍。（B）僅在韓牛樣品中強(qiáng)烈檢測(cè)到VIC熒光。最后，文章Results and Discussion給出-數(shù)字PCR適合作為驗(yàn)證物種特異性標(biāo)記的平臺(tái)。綜上，對(duì)于naica??微滴芯片數(shù)字PCR技術(shù)，準(zhǔn)確定量絕對(duì)拷貝數(shù)是一個(gè)關(guān)鍵特征，相比qPCR準(zhǔn)確性更高，naica?微滴芯片數(shù)字PCR為本文的檢測(cè)提供了有利的支持，也驗(yàn)證了這一特征。在不久的將來(lái)，通過(guò)將物種識(shí)別工具應(yīng)用于naica??微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)，它作為大樣本量物種鑒定平臺(tái)具有巨大潛力。所以naica??微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)適合作為驗(yàn)證物種特異性標(biāo)記的平臺(tái)。期刊介紹：Genomics & Informatics是由韓國(guó)基因組組織發(fā)行的涉及農(nóng)業(yè)和生物科學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)、健康信息學(xué)等領(lǐng)域的期刊。
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- 2022-04-29 12:54:04直播回顧 | 抽絲剝繭，超多重免疫標(biāo)記解密腫瘤微環(huán)境之奧秘
- 4月20日上午，徠卡與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)網(wǎng)共同舉辦了網(wǎng)絡(luò)研討會(huì)——“抽絲剝繭，超多重免疫標(biāo)記解密腫瘤微環(huán)境之奧秘”。徠卡生命科學(xué)部的高級(jí)應(yīng)用專(zhuān)員劉繼紅和Cell DIVE應(yīng)用科學(xué)家Michael Smith為廣大觀眾揭示了CELL DIVE 超多重標(biāo)記解決方案如何輕松應(yīng)對(duì)復(fù)雜的腫瘤微環(huán)境，為臨床腫瘤的研究和治 療提供了優(yōu)秀的研究工具。Indica Labs應(yīng)用科學(xué)家趙永田重 點(diǎn)介紹了在HALO中對(duì)獲取的Cell DIVE圖像的處理、分析步驟以及如何進(jìn)行高緯的空間生物學(xué)分析，用以了解腫瘤微環(huán)境中腫瘤細(xì)胞和免疫細(xì)胞的相互作用關(guān)系對(duì)研究腫瘤免疫應(yīng)答的作用機(jī)制。01CELL DIVE使用的抗體是開(kāi)放的嗎？有大約多少種經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的抗體？A：CELL DIVE 的抗體是開(kāi)放的，有350種以上的抗體經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的抗體可以使用。02CELL DIVE可以在臨床上用嗎，是否有注冊(cè)證？A：目前沒(méi)有注冊(cè)證，正在申請(qǐng)中。03這個(gè)平臺(tái)的檢測(cè)聯(lián)系哪位呢？A：可以聯(lián)系Leica公司各地的應(yīng)用支持和銷(xiāo)售。04這個(gè)染色是儀器自動(dòng)染色嗎？A：可以手動(dòng)染色也可以和自動(dòng)染色儀聯(lián)用自動(dòng)染色。05哪個(gè)實(shí)驗(yàn)室可以檢測(cè)？A：Leica公司有DEMO機(jī)，可以提供一定的演示。06成像是全片還是一個(gè)視野？A：成像儀可以選擇全片成像或者選取一個(gè)或多個(gè)視野成像。07怎樣避免非特異性染色 ？核陽(yáng)性的和胞漿包膜可以隨意搭配嗎？A：首先要選擇特異性好的抗體，我們抗體庫(kù)的抗體都是經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的抗體。細(xì)胞核陽(yáng)性和胞漿包膜理論上可以自由搭配。08每一輪染完了，除了染料失活，是不是還需要去除一抗？A：每一輪染色成像完成，染料失活 不需要去除一抗。09CELL DIVE是不需要摸索一抗?jié)舛鹊膯?，固定的protocol會(huì)不會(huì)造成有的組織染不出來(lái)有的組織卻染色過(guò)強(qiáng)？A：徠卡的protocol適用于絕大多數(shù)的組織，有些組織的某個(gè)marker 表達(dá)特別高或者特別低，可能需要修改抗體濃度。10抗體是什么方法學(xué)檢測(cè)標(biāo)記？除了主講人介紹的熒光濾鏡，能否使用其他的熒光標(biāo)記和濾鏡？A：抗體驗(yàn)證時(shí)參照同樣marker的免疫組化的結(jié)果；為了減少串色的發(fā)生，我們推薦使用Cy2、Cy3、Cy5、Cy7光譜基本相同的染料標(biāo)記。11成像也是設(shè)備自動(dòng)化進(jìn)行的嗎？A：成像時(shí)設(shè)備自動(dòng)進(jìn)行的，但是可以在拍照前根據(jù)樣本的染色情況進(jìn)行優(yōu)化。12Did you find any nonspecific staining while utilizing the different CD markers for immune cells?（Michael Smith）A：The Cell DIVE solution comes with a list of 350+ antibodies that have been validated for use with the workflow, and for specificity and sensitivity. For antibodies that are not used from the list, we provide details on a three part antibody validation process that also ensures that antibodies used are specific. In the case of residual nonspecific signal, this is likely removed by the autoflourescence imaging and removal of that signal that occurs at every round. So, in our hands, nonspecific staining is minimized at the level of antibody quality control and the image processing that the software performs.13關(guān)于細(xì)胞間鄰近距離的分析，我們?nèi)绾卧O(shè)定所計(jì)算的距離范圍？A：關(guān)于細(xì)胞間鄰近距離的分析，所定義距離的范圍目前還沒(méi)有相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)。考慮到不同細(xì)胞亞型的相互作用，不同免疫細(xì)胞亞群之間鄰近距離的設(shè)定可能需要不同的標(biāo)準(zhǔn)。在分析中，HALO可以對(duì)距離進(jìn)行設(shè)定，并按照不同的區(qū)間（例如0~5μm，5~10μm，10~15μm……）給出鄰近細(xì)胞的數(shù)量和密度。分析中先進(jìn)行預(yù)分析，根據(jù)不同距離范圍內(nèi)免疫細(xì)胞的密度和臨床信息進(jìn)行相關(guān)性分析。再把確定的距離應(yīng)用到所用的樣本切片中。14在分析過(guò)程中，我們可以選擇局部視野進(jìn)行分析嗎？還是僅能對(duì)全組織切片進(jìn)行分析？A：分析中，我們建議針對(duì)全景組織切片進(jìn)行分析，但HALO也可以定義ROI區(qū)域進(jìn)行選擇性的視野進(jìn)行分析。這兩種分析方法在HALO里都可以實(shí)現(xiàn)的。
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- 2021-09-01 11:46:11化學(xué)發(fā)光試劑吖啶酯在抗體蛋白上的標(biāo)記
- 診斷試劑中化學(xué)發(fā)光底物吖啶酯的標(biāo)記原理化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)中，我們用吖啶酯先標(biāo)記上抗體蛋白，才能在免疫反應(yīng)后對(duì)待測(cè)物進(jìn)行檢測(cè)，因此如何標(biāo)記抗體就非常的關(guān)鍵了。吖啶鹽和相關(guān)化合物已被廣泛證明為非常有用的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物，其穩(wěn)定性、標(biāo)記特異性和檢測(cè)靈敏度都超越放射性同位素。吖啶酯-NHS即吖啶琥珀酰亞胺酯(本試劑盒所提供)能與蛋白質(zhì)的一級(jí)氨基發(fā)生反應(yīng)。在堿性條件下，NHS作為離去基團(tuán)被取代，蛋白質(zhì)與吖啶酯形成穩(wěn)定的酰胺鍵。反應(yīng)完成后，多余的吖啶鹽通過(guò)脫鹽柱除去。在堿性過(guò)氧化氫存在下，吖啶標(biāo)記的蛋白不需要酶催化就可自行發(fā)光。因此激發(fā)液的加入導(dǎo)致反應(yīng)體系立即釋放約430nm的光子，通過(guò)使用標(biāo)準(zhǔn)光度計(jì)luminometer計(jì)數(shù)光子數(shù)量就可檢測(cè)蛋白質(zhì)的濃度。因?yàn)榇税l(fā)光過(guò)程是十分短暫(整個(gè)過(guò)程在2秒鐘內(nèi)完成)，樣品必須直接放在光度計(jì)內(nèi)部光子探測(cè)器前面。蛋白質(zhì)、多肽、抗體、核酸都可以用吖啶酯標(biāo)記?；瘜W(xué)發(fā)光試劑這里需要注意的是，溶解吖啶琥珀酰亞胺酯時(shí)，使用的DMF必須嚴(yán)格無(wú)水，防止吖啶酯水解不使用時(shí)，干燥密封-20°℃保存。針對(duì)傳統(tǒng)吖啶酯，在其結(jié)構(gòu)上進(jìn)行了修飾，增大了位阻，增強(qiáng)了抗水解性。如在室溫下，在pH為7.0的PB緩沖液中很穩(wěn)定。如果是不含-NHS的吖啶羧酸需要加入縮合劑EDCI等，才能與含胺基的蛋白發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng)。吖啶酰肼，含有游離氨基，吖啶酰肼末端適用直接偶聯(lián)含有醛基的多糖核酸或者蛋白質(zhì)等。德晟自05年就開(kāi)始研發(fā)生產(chǎn)血液檢測(cè)體外診斷方面試劑，對(duì)新型Trinder's試劑、生物緩沖劑及化學(xué)發(fā)光試劑有著較深的研究,專(zhuān)業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)和生產(chǎn)設(shè)備，目前，公司的生產(chǎn)設(shè)備、工藝和流程都是新升級(jí)的。每一件產(chǎn)品都經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)質(zhì)量人員檢測(cè)認(rèn)證，確保產(chǎn)品質(zhì)量?？梢苑判馁?gòu)買(mǎi)。歡迎詢價(jià)。
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