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2025-01-10 17:03:03寡核苷酸分析
寡核苷酸分析是一種用于研究短鏈核酸（通常少于100個核苷酸）的技術(shù)。該技術(shù)通過一系列生物化學(xué)和物理方法，如質(zhì)譜、電泳、熒光檢測等，對寡核苷酸的序列、純度、濃度及修飾狀態(tài)進行精確測定。寡核苷酸分析在基因工程、分子診斷、藥物研發(fā)等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用，能夠幫助科學(xué)家理解基因功能、疾病機制，并設(shè)計高效的基因治療策略。此外，它還能確保合成的寡核苷酸滿足實驗要求，提高研究的準(zhǔn)確性和可靠性。

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2020-12-15 17:10:15寡核苷酸類藥物的HPLC分析 (二) TSKgel SEC色譜柱應(yīng)用例
上篇文章《寡核苷酸類藥物的HPLC分析 (一) TSKgel IEC色譜柱應(yīng)用例》中我們提到了隨著寡核苷酸藥物的研發(fā)步伐越來越快，對高純度寡核苷酸產(chǎn)品的需求也日趨旺盛。目前，寡核苷酸主要是通過化學(xué)合成法制成，在合成過程中會產(chǎn)生工藝相關(guān)雜質(zhì)和產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)，離子交換液相色譜法是分析這些雜質(zhì)的重要手段之一。此篇文章我們將介紹尺寸排阻色譜法在寡核苷酸藥物質(zhì)量控制中的應(yīng)用。在寡核苷酸的分析中，尺寸排阻分離模式是基于堿基數(shù)量、磷酸基不同導(dǎo)致的分子量差別進行分離，通常用于簡單的質(zhì)量控制或純度研究。該模式的優(yōu)點是可以使用接近生理條件的洗脫溶液進行等度分離。有時也會添加水溶性有機溶劑來YZ疏水吸附。分析不同堿基數(shù)目的寡核苷酸下圖是采用兩根串聯(lián)的SEC色譜柱TSKgel UP-SW2000來區(qū)分長度相差一個堿基的寡核苷酸混合物 (20-mer和N-1 19-mer)。TSKgel UP-SW2000是東曹生命科學(xué)ZX開發(fā)的粒徑2μm、孔徑12.5nm的硅膠基質(zhì)SEC色譜柱，主要用于分離分子量范圍為1-150kDa的小蛋白、肽和寡核苷酸等生物分子。該色譜柱兼容HPLC和UHPLC系統(tǒng)，因此也能夠從傳統(tǒng)的HPLC-SEC方法轉(zhuǎn)換到UHPLC。下圖是使用TSKgel G2000SWXL色譜柱分離不同堿基數(shù)量的合成寡核苷酸混合物的譜圖。為了YZ核酸酶活性，有時會在流動相中添加EDTA等約1 mmol/L的螯合劑。SEC法分離脂質(zhì)體包被的siRNA下圖是使用TSKgel SuperSW2000色譜柱對天然型DNA核酸藥物Defitelio進行質(zhì)量分析的示例。參考文獻：Handbook of analysis of oligonucleotides and related Products, Feb.23 (2011) 125, Edited by J.V. Bonilla et al.寡核苷酸分析用SEC色譜柱下表中列出了適用于核酸分離的SEC色譜柱。對于＜375 bp的短鏈核酸或寡核苷酸，UP-SW3000、UP-SW2000、G3000SWXL以及G2000SWXL這幾款色譜柱都是比較推薦的。
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2020-12-15 16:52:34寡核苷酸類藥物的HPLC分析 (一) TSKgel IEC色譜柱應(yīng)用例
概述寡核苷酸是一類只有50個以下堿基的短鏈核苷酸的總稱（包括脫氧核糖核酸DNA或核糖核酸RNA的核苷酸）。近幾年，隨著寡核苷酸療法在ZL各種疾病適應(yīng)癥方面取得了臨床上顯著的進展，已有多種寡核苷酸類藥物，如小干擾RNA (siRNA) 和反義寡核苷酸 (ASO) 藥物獲得了FDA上市批準(zhǔn)。另外還有多種microRNA (miRNA) 和適配體 (Aptamer) 正在研發(fā)中。因此，更大量、更高純度的寡核苷酸產(chǎn)品的需求也隨之日益增長。東曹生命科學(xué)提供多種具有高分辨率、選擇性的色譜柱和層析填料產(chǎn)品以滿足從分析到純化制備不同規(guī)模的應(yīng)用需求。寡核苷酸的HPLC分離模式下表中列舉了寡核苷酸HPLC分析的幾種分離模式及適用的分離條件。也可以通過連用MS進行檢測。ZL性寡核苷酸是由固相化學(xué)合成法制成。在合成過程中會產(chǎn)生工藝相關(guān)雜質(zhì)和產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)。產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)包含許多目標(biāo)產(chǎn)物的類似物（分子量的差別：堿基數(shù)n-1、n、n+1等），磷酸基S化等的不對稱化合物、異構(gòu)體等。因此，雜質(zhì)的分析監(jiān)控對工藝和質(zhì)量控制就顯得十分重要。一般而言，通過陰離子交換色譜法即可實現(xiàn)這一分析需求。寡核苷酸IEC-HPLC分析下圖是使用TSKgel DNA-STAT陽離子交換色譜柱分離具有不同序列的4種寡核苷酸引物 (單鏈) 。在IEC分離模式中，如果使用無孔填料的色譜柱可以提高分辨率。此款色譜柱采用的是親水性無孔樹脂填料，粒徑5μm，表面由開放型多層陰離子交換基團構(gòu)成。這些特性與創(chuàng)新的化學(xué)鍵合方法相結(jié)合，使其載量更高、操作壓力更低，非常適合于寡核苷酸的高分辨率分析。寡核苷酸的純度檢測在離子交換色譜柱中，可以對離子基團與主成分有一處不同的化合物進行分離，比如能夠分離n-1、n、n+1的化合物。下圖是TSKgel DNA-NPR陽離子交換色譜柱對13個堿基的硫代磷酸寡核苷酸粗樣分析的色譜圖。TSKgel DNA-STAT色譜柱對粗制的寡核苷酸與純化后的樣品進行純度評估。寡核苷酸的分析要點1、根據(jù)核酸樣品的穩(wěn)定性和大小來選擇合適的洗脫液。如果核酸的穩(wěn)定性很高，可以采用堿性溶液 (NaOH，pH12) 和高溫60℃條件下分離，可提高分辨率。如果是穩(wěn)定性差的，則推薦使用pH7-8的中性洗脫液，溫度40℃條件下分離。2、在樣品吸附強的情況下，可使用比NaCl或NaBr洗脫能力更強的NaClO4進行梯度分離。3、如果樣品是超巨大雙鏈DNA (如質(zhì)粒DNA)，使用TSKgel DEAE-NPR (4.6mm I.D.×3.5cm) 的話不僅可以獲得高分辨率，而且回收率也會更好。
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2024-11-20 16:39:48粒度分析儀主要分析什么
粒度分析儀是一種廣泛應(yīng)用于各類行業(yè)中，用于測定物料顆粒大小分布的儀器。通過粒度分析，我們能夠了解物質(zhì)的粒度特性，這對于工業(yè)生產(chǎn)、科研實驗和質(zhì)量控制至關(guān)重要。粒度分析儀的主要功能是通過不同的分析方法，精確測量物料顆粒的大小、形態(tài)及其分布情況，進而為后續(xù)的生產(chǎn)工藝、配方優(yōu)化以及產(chǎn)品質(zhì)量檢測提供重要數(shù)據(jù)支持。粒度分析儀的工作原理粒度分析儀通過不同的技術(shù)手段來測定顆粒的尺寸、分布以及形態(tài)。常見的粒度分析方法包括激光衍射法、光散射法、篩分法等。激光衍射法是常用的一種，通過測量顆粒對激光束的衍射模式來推算出顆粒的大小分布。光散射法則基于顆粒與光相互作用后的散射情況來分析顆粒大小。而篩分法則主要應(yīng)用于較大顆粒物料的粒度分析，通過篩網(wǎng)篩選顆粒的大小。粒度分析儀的應(yīng)用領(lǐng)域粒度分析儀被廣泛應(yīng)用于礦業(yè)、化工、制藥、食品、環(huán)保等多個行業(yè)。在礦業(yè)中，粒度分析儀幫助確定礦石的粒度分布，進而優(yōu)化選礦過程；在制藥行業(yè)，粒度的大小直接影響藥品的溶出速度和生物利用度，因此粒度分析儀能夠確保藥品的質(zhì)量；在食品加工中，粒度分析儀能夠確保產(chǎn)品的口感和外觀質(zhì)量；在環(huán)保領(lǐng)域，粒度分析儀用于檢測污染物質(zhì)的顆粒特性，為環(huán)境保護提供數(shù)據(jù)支持。粒度分析儀的重要性粒度分析不僅僅是對物質(zhì)顆粒大小的簡單測量，它還對整個生產(chǎn)過程、產(chǎn)品性能以及質(zhì)量控制起到?jīng)Q定性作用。通過精確的粒度分布數(shù)據(jù)，企業(yè)可以優(yōu)化工藝流程，降低生產(chǎn)成本，并提高終產(chǎn)品的質(zhì)量。例如，在水泥生產(chǎn)中，粒度分布的均勻性直接影響水泥的強度與耐久性；在食品行業(yè)中，粒度的控制能夠影響口感和消費者的接受度?？偨Y(jié)粒度分析儀作為一種高精度的測量工具，對于各行各業(yè)的質(zhì)量控制、工藝優(yōu)化和產(chǎn)品研發(fā)都有著不可或缺的重要作用。通過準(zhǔn)確測量顆粒的大小和分布情況，能夠為生產(chǎn)過程提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)支持，從而提高產(chǎn)品的品質(zhì)和市場競爭力。因此，粒度分析儀在現(xiàn)代工業(yè)生產(chǎn)中的地位和作用不可忽視，是實現(xiàn)精細化管理和高效生產(chǎn)的重要保障。
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2024-12-05 17:22:00壓汞儀數(shù)據(jù)怎么分析
在現(xiàn)代材料科學(xué)、物理學(xué)和工程學(xué)領(lǐng)域，壓汞儀作為一種重要的分析工具，用于測量多孔材料的孔徑分布、孔容以及比表面積等關(guān)鍵特性。通過對壓汞儀數(shù)據(jù)的科學(xué)分析，可以有效地揭示樣品的微觀結(jié)構(gòu)特征，幫助研究人員深入理解材料的性能與應(yīng)用潛力。壓汞儀數(shù)據(jù)的分析不僅僅是簡單地讀取數(shù)值，還需要結(jié)合一定的理論基礎(chǔ)與專業(yè)方法，才能確保結(jié)果的準(zhǔn)確性與可用性。本文將詳細探討如何科學(xué)地分析壓汞儀數(shù)據(jù)，從數(shù)據(jù)采集到結(jié)果解讀，提供一套全面且實用的分析框架。壓汞儀數(shù)據(jù)的基本理解壓汞儀通過將汞注入材料的孔隙并施加不同壓力，進而測量汞的侵入量。由于汞無法進入水的表面張力較大的孔隙，壓力的增加使得汞能夠逐漸滲透到較小的孔徑。通過這些數(shù)據(jù)，我們可以繪制出孔徑分布曲線，進一步計算出孔容、比表面積等重要參數(shù)。為了分析這些數(shù)據(jù)，首先需要掌握的就是如何讀取壓汞儀的原始數(shù)據(jù)和理解其背后的物理含義。數(shù)據(jù)分析的核心步驟數(shù)據(jù)預(yù)處理 在分析之前，原始數(shù)據(jù)需要進行一些基礎(chǔ)的處理。常見的預(yù)處理步驟包括：去除無關(guān)數(shù)據(jù)、處理異常值、標(biāo)定壓力與孔徑之間的關(guān)系等。合適的預(yù)處理能有效消除測量過程中的系統(tǒng)誤差，確保后續(xù)分析的可靠性。比表面積和孔容的計算 根據(jù)孔徑分布曲線，我們可以進一步計算出比表面積和孔容。比表面積通常使用BET理論進行計算，而孔容則可通過求解不同孔徑范圍內(nèi)的總汞侵入量來得出。比表面積和孔容是評估多孔材料性能的兩個關(guān)鍵參數(shù)，尤其在催化、吸附等領(lǐng)域具有重要意義。結(jié)果的驗證與優(yōu)化 經(jīng)過初步計算后，需要對得到的分析結(jié)果進行驗證。常見的驗證方法包括與其它實驗數(shù)據(jù)進行對比，或通過模擬計算與實驗結(jié)果的擬合來驗證數(shù)據(jù)的合理性。在實際應(yīng)用中，可能需要通過調(diào)整儀器設(shè)置或測量條件來進一步優(yōu)化結(jié)果的精度。專業(yè)解讀與注意事項壓汞儀數(shù)據(jù)的分析過程中，除了要關(guān)注儀器的操作和數(shù)據(jù)處理外，還需要特別注意以下幾點：孔隙形態(tài)的多樣性：多孔材料往往呈現(xiàn)復(fù)雜的孔隙結(jié)構(gòu)，分析時需根據(jù)材料的實際情況選擇合適的分析模型。壓力范圍的選擇：不同的壓力范圍會影響數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。過高的壓力可能導(dǎo)致汞進入不應(yīng)進入的孔隙，過低的壓力則可能無法充分反映材料的細孔特性。數(shù)據(jù)的可靠性：數(shù)據(jù)是否具有統(tǒng)計學(xué)意義是驗證分析結(jié)果的關(guān)鍵。合理的重復(fù)性測試與精確的控制變量能夠大大提高結(jié)果的可靠性。
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2025-05-19 11:15:17透射電鏡怎么分析粒徑
透射電鏡怎么分析粒徑 透射電鏡（Transmission Electron Microscopy, TEM）作為一種高分辨率的成像技術(shù)，廣泛應(yīng)用于材料科學(xué)、生命科學(xué)及納米技術(shù)等領(lǐng)域。粒徑分析是透射電鏡技術(shù)中的一項重要應(yīng)用，它能夠精確地測量樣品中微小顆粒的尺寸。通過透射電鏡分析粒徑，不僅可以揭示顆粒的分布情況，還可以幫助我們理解材料的物理、化學(xué)性質(zhì)以及其在不同應(yīng)用中的表現(xiàn)。本篇文章將深入探討透射電鏡如何進行粒徑分析，涉及基本原理、常用方法及其優(yōu)勢。 透射電鏡原理及其在粒徑分析中的作用 透射電鏡通過電子束穿透樣品，產(chǎn)生具有高分辨率的圖像，這使得其能夠觀察到納米級甚至原子級別的結(jié)構(gòu)。樣品通過電子束照射后，電子與物質(zhì)相互作用，部分電子被散射，部分電子透射通過樣品形成圖像。在圖像中，顆粒的邊緣、形態(tài)及大小都能被精確地展示出來。 粒徑分析是通過對透射電鏡圖像中顆粒的尺寸進行測量，通常使用的是“直徑法”或“長徑法”。直徑法通過測量顆粒的大橫向直徑來獲得粒徑，而長徑法則通過測量顆粒的大長度與大寬度，從而得出其平均粒徑。為了保證測量的準(zhǔn)確性，通常需要選擇多個圖像區(qū)域進行分析，減少誤差。 粒徑分析常用方法 在透射電鏡中，粒徑分析的方法有多種，常見的包括手動測量法和自動化分析法。 手動測量法：這種方法較為直接，研究人員通過在透射電鏡圖像上手動測量顆粒的尺寸，常用工具有圖像分析軟件。這種方法的優(yōu)點是操作簡便，但缺點是容易受人為因素的影響，測量精度較低。 自動化分析法：自動化圖像分析軟件通過算法自動識別圖像中的顆粒輪廓，并計算出其尺寸。隨著圖像處理技術(shù)的進步，自動化分析法已成為一種高效且精確的粒徑分析工具。該方法不僅提高了分析效率，還能顯著減少人為誤差，使得粒徑分布的統(tǒng)計結(jié)果更加可靠。 透射電鏡分析粒徑的優(yōu)勢 透射電鏡在粒徑分析中的優(yōu)勢主要體現(xiàn)在其極高的分辨率和靈敏度。與光學(xué)顯微鏡相比，透射電鏡能夠觀察到更為細微的顆粒，甚至可以在原子尺度上進行分析。它不僅能夠提供顆粒的尺寸信息，還能展示顆粒的形狀、分布及聚集狀態(tài)等重要特征。透射電鏡還能夠通過不同的成像模式（如高分辨率成像、選區(qū)電子衍射等）提供更多的結(jié)構(gòu)信息，從而更全面地理解樣品的物理性質(zhì)。 結(jié)論 透射電鏡在粒徑分析中的應(yīng)用，憑借其高分辨率、精確度以及多樣化的成像方式，成為了分析納米材料和微小顆粒尺寸的強有力工具。隨著自動化技術(shù)的發(fā)展，透射電鏡在粒徑分析中的效率和精度不斷提升，為材料科學(xué)的研究提供了更加可靠的數(shù)據(jù)支持。理解透射電鏡的基本原理及分析方法，將為科研人員在納米技術(shù)、材料開發(fā)等領(lǐng)域的研究提供更加深入的技術(shù)保障。
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